El Servicio de Imagen y Microscopía Avanzada (SIMA) es un servicio adscrito al Instituto de Tecnologías Biomédicas (ITB) y a la Universidad de La Laguna (ULL). El objetivo de este servicio es dotar a los grupos de investigación de la ULL, a organismos públicos y privados y empresas insulares y nacionales de nuestro entorno, con los equipos y el soporte técnico necesarios para realizar experimentos de microscopía avanzados (Epifluorescencia, Confocal, Contraste de fases y Normarski, FRAT, FRET, etc.), tanto en muestras fijadas como en célula viva. Además, se pretende facilitar el análisis y la cuantificación de las imágenes de microscopía generadas por los usuarios.
Instituto de Tecnologías Biomédicas
Servicio de Imagen y Microscopía Avanzada (SIMA)
- Microscopía convencional de fluorescencia.
- Microscopía de superresolución (STED y dSTORM)
- Detección de marcajes inmunocitoquímicos mediante anticuerpos marcados con fluorocromos tanto en cultivos celulares como en cortes histológicos.
- Hibridación in situ con sondas fluorescentes (FISH)
- Obtención de micromuestras a partir de cortes histológicos mediante microdisección láser.
- Análisis de células in vivo y a tiempo real mediante marcadores y/o proteínas de fusión fluorescentes y derivados, en condiciones de temperatura y atmósfera controladas.
- Estudios de colocalización, de internalización y tráfico intracelular.
- Análisis fisiológico de respuesta de Ca2+.
- Estudio de interacciones entre proteínas mediante la técnica FRET (Fluorescence Resonance Energy Transfer)
- Estudio de transporte de proteínas mediante la técnica FRAP (Fluorescence Recovery After Photobleaching)
- Determinación de espectros de fluorescencia (Lambda Scan)
- Tratamiento de imágenes y cuantificación con programas especializados: LAS X, Huygens Deconvolution, ImageJ/ Fiji.
Asimismo, el SIMA realiza otras tareas como:
- Mantenimiento y coordinación del uso de los distintos microscopios propios del Servicio.
- Soporte técnico en el uso de los microscopios y software de procesamiento de imagen para personal no formado.
- Formación obligatoria para usuarios en régimen autónomo.
- Asesoramiento y soporte técnico a los usuarios.
- Realización de procedimientos experimentales.
- Preparación de muestras.
MICROSCOPIO CONFOCAL OLYMPUS FV1000:
- Microscopio invertido Olympus IX81, con pletina XY motorizada.
- 3 PMTs (detectores fotomultiplicadores)
- 1 detector de luz transmitida.
- Lámpara de mercurio para fluorescencia.
- Cámara de incubación con control de temperatura y C02 para célula viva.
- Objetivos: 10X/0.3 NA, 20X/0.75 NA, 40X/1.30 NA y 60 X/1.35 NA.
- Filtros de fluorescencia para DAPI, FITC y TRITC.
- Líneas de láser: diodo láser de 405 nm, láser de Argón multilínea 458/488/514 nm, láser de Helio Neón verde de 543 nm, y láser de Helio Neón rojo de 633 nm.
- Sistema de barrido de 4096×4096.
- Velocidad de barrido de 4fps en 512×512.
MICROSCOPIO DIRECTO DE EPIFLUORESCENCIA LEICA DM 4000B:
- Objetivos 5X/0.15 NA, 10X/0.30 NA, 20X/0.5 NA, 40X/0.75 NA y 100X/1.30 NA para inmersión en aceite.
- Software para análisis de imagen Q-Win y Q-fluoro.
MICROSCOPIO CONFOCAL LEICA TCS SP8:
- Microscopio invertido DM6000, con platina XY motorizada y pletina galvanométrica en Z.
- 4 detectores: 2 PMT fotomultiplicadores y 2 híbridos del tipo HyD (PMT+GaAsP)
- 1 detector de luz transmitida.
- Lámpara de haluros metálicos para fluorescencia.
- Cámara de incubación con control de temperatura y C02 para célula viva.
- Objetivos: 10X/0.40 NA, 20X/0.70 NA, 40X/0.85 NA, 40X/1.30 NA, y 63X/1.40 NA.
- Filtros de fluorescencia para DAPI, FITC y TRITC.
- Líneas de láser: diodo láser de 405 nm, láser de Argón multilínea 458/488/514 nm, diodo láser de 561 nm y láser de Helio Neón rojo de 633 nm.
- Sistema de barrido de alta resolución de 8192×8192; (x) velocidad de barrido de 4fps en 512×512.
- Software LAS AF con módulos para colocalización FRET y FRAP.
SISTEMA DE MICROSCOPÍA DE SUPERRESOLUCIÓN POR AGOTAMIENTO DE EMISIÓN ESTIMULADA (STED) ACOPLADA AL MICROSCOPIO TCS SP8:
- 2 láser de STED de alta potencia (>1,5 W) de longitud de onda de 592 nm y de 660 nm, para depleción.
- Acoplamiento óptico mediante ultra-precisa fibra óptica con “Votex phase filter” y polarización óptica para mejora de resolución, optimización de cero PSF.
- Rack que integra láser de STED, control electrónico y modulación óptica (AOTF)
- Integración en el software del confocal LAS X.
- Implementación de software de deconvolución con algoritmos especialmente dedicados a imágenes STED.
- Paquete de software deconvolución, visualización y análisis para imágenes STED y confocal.
- Objetivo optimizado para aplicaciones STED, PLAN APO 100x/1,40 aceite STED White.
- Módulo 3D STED.
- Mesa antivibratoria activa.
- Mesa óptica activa.
UNIDAD DE MICROSCOPÍA DE REFLEXIÓN INTERNA TOTAL (TIRF) ACOPLADA A ELECTROFISIOLOGÍA Y ESPECTROSCOPIA.
- Sistema completo de electrofisiología (patch-clamp. Axon/Molecular Devices) acoplado a microscopio TiU equipado con módulo TIRF, sistema DMD, Iluminación LED SpectraX (Lumencor) con juegos de filtros para todas las longitudes de onda disponibles en torretas de filtros motorizadas.
- Sistema de imagen compuesto de cámara EMCCD Andor IXON, acoplado a un espectrógrafo ACTON con rejillas de difracción y espejo.
- Interfase NiDAQ, software MicroManager y NIS-Elements (NIKON)
- Sistema acoplado a dos posibles equipos de perfusión, uno ultra-rápido (multichannel systems) y otro convencional (ALA systems)
SISTEMA DE MICRODISECCIÓN POR LÁSER LEICA AS LMD.
- Equipo completo estándar para la realización de microdisección de captura láser para aislar regiones o células de interés.
SERVICIOS OFERTADOS | PRECIOS (€) | ||
ITB | ULL | GENERAL | |
Observación, análisis e imagen | |||
Leica SP8 | 15 | 20 | 25 |
Olympus FV 1000 | 10 | 15 | 20 |
Microscopia Convencional/ de Fluorescencia | 7 | 12 | 15 |
Procesamiento de datos | |||
Tratamiento y análisis de imágenes/ hora | 12 | 20 | 35 |
Otras prestaciones | |||
Asistencia técnica/ hora | 11 | 16 | 22 |